标本固定、处理及蜡块选择的相关细节
免疫组化染色过程中抗原保存完整、不弥散或丢失是实验成功的重要保证。在一张组织或细胞已坏死、抗原已丢失的材料上,再好的技术和抗体也难以染色成功。组织处理之前必须保证组织充分固定,如果固定不适当、不完全,有可能会改变组织的染色特性。优良的组织蜡块不仅需要良好的组织固定,还要经过规范的组织脱水、透明、浸蜡、包埋等一系列组织处理步骤。避免选择不正确的固定、干涸、冷冻、坏死、化学脱钙等可造成染色假象、抗体诱捕的组织蜡块。
选择做免疫组化较理想的蜡块既要有检测的肿瘤成分,又要有做内对照的正常成分。全自动免疫组化仪若使用冷冻组织,切片4-5μm厚,贴在防脱片载玻片上,立即放入4℃冷丙酮中固定约10min,取出约风干30min,若能风干过夜更佳。胸腹水等细胞学标本可取沉渣制成细胞学薄片后检测。